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绿色荧光蛋白标记在MEOR中的应用研究

张忠智,孙珊珊,王欲晓,罗一菁

石油化工高等学校学报 2009, 22 (4): 34-37. DOI: 10.3696/j.issn.1006-396X.2009.04.009

摘要（2250）

PDF （345KB）（480）

为了充分认识目的优势菌种经油藏运移后在产出水中分布的规律与数量,准确分析和客观评价MEOR现场试验效果,利用绿色荧光蛋白(GFP)基因标记目的菌,通过绿色荧光蛋白跟踪监测目的菌的动态信息。构建含有GFP基因的质粒pET-30a(+)-EGFP,并将其成功导入JD中。对构建的JD(gfp)工程菌进行培养发现,该工程菌在含有Kan质量浓度50μg/mL的培养条件下,重组质粒在JD(gfp)工程菌体内传代稳定,绿色荧光的表达稳定。但是在没有选择压力的培养条件下,重组质粒在JD工程菌胞体内有丢失现象。与野生菌混合培养,JD(gfp)工程菌具有很好的配伍性和竞争性,并且不发生重组质粒的水平转移,因此在环境中释放是安全的。

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提高原油采收率的耐热产多糖基因工程菌构建

伊文婧, 张忠智*,孙珊珊, 魏小芳, 罗一菁

石油化工高等学校学报 2007, 20 (4): 25-27.

摘要（263）

PDF （1051KB）（290）

为了提高用于微生物采油的掺水不溶性多糖的JD菌的耐温性能,将嗜热质粒pET-ecoRRF和pET
-tteRRF转化至菌株JD中,用卡纳霉素筛选转化子。在耐热性初步鉴定中,所构建的菌株可在45 ℃下生长;再进
行Western-blot检测确认,结果表明,RRF基因有高量的表达。RRF基因转化到JD菌中有较好的表达,提高了目
标菌株的耐热性能,耐热范围提高了5~8 ℃。由于Enterobactersp.和Escherichiacoli 的亲缘关系较近,所以将
Escherichiacoli 中的RRF基因在JD菌中表达效果比Thermusthermophilus 中的基因表达效果要好。最终将野生
JD菌改造成了一株能够在45℃耐热、产多糖的基因工程菌。

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外源微生物强化修复石油污染土壤的研究

魏小芳, 张忠智*,郭绍辉, 冀得坤, 罗一菁, 苏幼明

石油化工高等学校学报 2007, 20 (2): 1-4.

摘要（314）

PDF （1035KB）（386）

通过对大港油田石油污染土壤进行异位强化生物修复,考察投加外源微生物是否能够加速生物修复进程以及土壤中石油污染物质降解的影响因素。收集的土壤分为两组后充分混合,干土中含油质量分数分别为8416,16385mg/kg。通过监测降解过程土壤中油含量的变化,分别考察自然菌群、营养刺激自然菌群、不同外源微生物、疏松剂(锯末)、不同初始油含量等因素对石油污染物降解的影响。色谱-质谱分析手段分析降解前后石油污染物质组分的变化。石油污染土壤经过300d的处理,在水含量一定的前提下,外源微生物对于石油污染物质加速降解具有显著作用。疏松剂和外源微生物协同作用下除油效果显著,除油率高达79%。降解前后的石油物质色谱-质谱分析表明,相对分子质量小于C28的烷烃的微生物利用率高于相对分子质量大的烷烃,微生物可以有效降解多环芳烃。